保存于福尔马林溶液中的标本,由于组织内的血红蛋白破坏而失去颜色,不能反映器官的正常色泽。用保存方法处理的材料可以保持器官自然色泽。但成本较高,不宜用来大量制作解剖标本。下面介绍几种原色保存的方法。
一、用酒精还色的方法
这种方法要用酒精还色,制成的标本颜色鲜艳,但长期保存会逐渐褪色,制作过程如下。
(一)固定
取新鲜材料(不放血的更好),不要水洗,如标本不干净,可用纱布擦净。器官门部的血管可用蘸固定液的棉花填塞,然后放入下列溶液中固定,固定时要保持器官正常形态。
固定液配方:
福尔马林 200毫升
硝酸钾 15克
醋酸钾 30克
水 1,000毫升
固定液的量,应超过标本体积的3-5倍。固定时间根据标本的大小与结构不同而异,如胃、肠、血管等1-2天;心脏、子宫等3-5天;肝、肾等8-10天或更长。组织坚实而厚的器官可向器官内注射固定液。标本在上述固定液中时间不宜过长,标本取出后用手挤压,无血水流出即可,否则影响还色。如固定过程中溶液变混浊,应更换新液。标本在固定液中组织变硬,而且呈污红色(溶液使血红素转变为变性血红素)。
(二)水洗
固定完毕后,在流水中充分水洗,至无福尔马林气味,用棉花控去表面水分。
(三)还色
将标本浸入85-95%的酒精内1-2小时,甚至一日以上。标本在酒精内,逐渐恢复自然色泽(使变性血红素氧化),但时间不宜过长,还色后立即取出,否则易褪色。
(四)保存
用蒸馏水洗去酒精,将标本浸泡于下列保存液中,装瓶封存。
保存液配方:
甘油 200毫升
醋酸钾 100克
麝香草酚 2.5克
蒸馏水 1,000毫升
二、不用酒精还色的方法
这种方法不用酒精还色,比较经济并不易褪色,但颜色不及上法鲜艳。标本处理方法与上法同,仅自固定液取出后水洗,不经洒精溶液,直接浸于保存液中封存。
固定液配方:
人工盐 50克
水化氯醛(饱和液) 50毫升
福尔马林 50-100毫升
水 1,000毫升
保存液配方:
醋酸钾(钠) 300克
甘油 600毫升
水 1,000毫升
三、用饱和糖浆保存原色标本
按上述标本处理方法处理好的标本浸泡于饱和糖浆内。
饱和糖浆的配制:在一定数量的馏水中加入白食糖(砂糖、棉糖均可)直到饱和。然后煮沸,滤过。
保存于饱和糖浆中的原色标本,年久不褪色。
四、色素浸润法
先配制下列各种溶液:
1.高氯铁溶液5毫升+蒸馏水20毫升。
2.亚铁氰化钾2克+蒸馏水20毫升。
3.硝酸铅5克+蒸馏水20毫升。
4.重铬酸钾5克+蒸馏水20毫升。
5.单宁酸3克+蒸馏水20毫升(瓶盖盖紧)。
6.中性红2克+蒸馏水20毫升。
7.明矾5克+蒸馏水20毫升(加温溶解)。
然后把这几种溶液按需要配伍,则得各种颜色的着色剂:
3+4得铬黄色;
2+1得水蓝色;
4+5得焦茶色;
6+7得水红色;
1+5得黑色;
3+4+6+7呈橙黄色;
4+5+6+7呈赤褐色;
3+4+1+2呈铬绿色。
对于上述各溶液配伍所得的各种颜色如嫌太浅,则可适当加少量其他有关颜色的色料,以增深其色度。
着色前,要把材料放在预备好的保存液中浸渍一段时间,以利着色和保存。对表层附有脂肪或沾有油污的材料,必须先用乙醚脱脂,然后再进行着色。有的材料所附有的脂肪和所沾有的油污极少,也可以用脱脂棉蘸乙醚和纯酒精(1:1)的混合液轻拭材料表面。
色素浸润沉着法,适用于多种材料组织的着色,也可用于神经组织的着色。例如,把剥取出来的神经先用清水适当浸洗,然后移在滤纸上吸除附着的余水,再移至50%、70%的酒精中各固定1~2日(兼有脱脂作用)。固定后用细软毛刷或软毛笔蘸3液轻轻涂着,数分钟后再涂着4液,神经可迅速呈现黄色。最后待涂液干燥,再薄薄地涂上胶层,胶层适当干燥后,即可放入70%的酒精5份、5%的福尔马林2份、甘油少量的混合液中保存。
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